法律意識方面精選(五篇)

序言：作為思想的載體和知識的探索者，寫作是一種獨特的藝術(shù)，我們?yōu)槟鷾?zhǔn)備了不同風(fēng)格的5篇法律意識方面，期待它們能激發(fā)您的靈感。

篇1

關(guān)鍵詞：事實勞動關(guān)系；法律風(fēng)險；防范措施

一、事實勞動關(guān)系的內(nèi)涵及產(chǎn)生原因

（一）事實勞動關(guān)系的內(nèi)涵。所謂勞動關(guān)系，是指勞動者與勞動力使用者（用人單位）之間在勞動生產(chǎn)過程中建立或結(jié)成的關(guān)系。勞動關(guān)系具有以下特征：當(dāng)事人一方是勞動者，另一方必須是提供生產(chǎn)資料的用人單位；勞動者必須是基于職業(yè)的、為實現(xiàn)用人單位的勞動過程而進行有償?shù)膭趧樱粍趧诱弑仨毘蔀橛萌藛挝坏某蓡T，并遵守單位的內(nèi)部勞動規(guī)則，主體雙方具有平等性和隸屬性。

事實勞動關(guān)系是用人單位與勞動者之間既無勞動合同又存在著勞動關(guān)系的一種狀態(tài)。事實勞動關(guān)系區(qū)別于勞動關(guān)系只因其缺乏法律所規(guī)定的形式要件―書面勞動合同，但其本質(zhì)上屬于勞動關(guān)系。是否成立事實勞動關(guān)系可依據(jù)其是否具有勞動關(guān)系的特征來判斷。

（二）事實勞動關(guān)系產(chǎn)生的原因。實踐中，事實勞動關(guān)系大量存在，但究其產(chǎn)生的原因主要集中在以下兩點：其一，自勞動關(guān)系建立之時起，從未訂立書面勞動合同。依據(jù)《中華人民共和國勞動合同法》（以下簡稱《勞動合同法》）第十條： “建立勞動關(guān)系，應(yīng)當(dāng)訂立書面勞動合同。已建立勞動關(guān)系，未同時訂立書面勞動合同的，應(yīng)當(dāng)自用工之日起一個月內(nèi)訂立書面勞動合同。用人單位與勞動者在用工前訂立勞動合同的，勞動關(guān)系自用工之日起建立。”可見，引起勞動關(guān)系產(chǎn)生的基本法律事實是用工，而不是訂立勞動合同，其目的保護事實勞動關(guān)系中勞動者的權(quán)益，而非肯定用人單位不與勞動者訂立勞動合同的行為。在就業(yè)競爭激烈，勞動力供大于求的情況下，不簽勞動合同用人單位便擁有更多的靈活性，是否簽訂勞動合同的主動權(quán)往往掌握在用人單位手中。我國勞動法對勞動者的傾斜保護的立法宗旨，要求建立勞動關(guān)系應(yīng)當(dāng)訂立書面勞動合同的規(guī)定，使一些人錯誤地認(rèn)為：訂立了勞動合同勞動者就受勞動法的保護，未訂立勞動合同的勞動法不給予保護。用人單位為逃避相關(guān)法律法規(guī)的強制性義務(wù)如繳納社會保險等不與勞動者簽書面勞動合同。現(xiàn)實中，不簽訂勞動合同也可能是勞動者認(rèn)為有了書面勞動合同會約束自己不能隨意“跳槽”，主動要求不簽或者故意拖延不簽而用人單位沒有及時作出處理。再或者是雙方法律意識淡薄，根本沒有意識到建立勞動關(guān)系必須簽訂書面勞動合同，達(dá)成了不簽勞動合同的合意。其二，原勞動合同期滿后，當(dāng)事人未續(xù)訂新的勞動合同，但勞動者仍在該單位繼續(xù)勞動。人力資源管理實踐中，當(dāng)原有勞動合同即將期滿時，用人單位應(yīng)以明示的方式通知勞動者，否則，很容易造成新勞動合同未簽，原勞動合同已期滿，勞動者仍然在用人單位繼續(xù)工作，勞動關(guān)系以原勞動合同相關(guān)約定存續(xù)著。此種情況下，雖然看似雙方默示約定，但用人單位往往會很被動，甚至承擔(dān)意料之外的法律風(fēng)險。

二、事實勞動關(guān)系中用人單位面臨的法律風(fēng)險

（1）用人單位新聘用員工，不依法簽訂書面勞動合同的，將面臨支付“雙倍工資”的風(fēng)險。依據(jù)《勞動合同法》及相關(guān)實施條例規(guī)定，用人單位與勞動者應(yīng)當(dāng)自用工之日起一個月內(nèi)訂立書面勞動合同，超過一個月不滿一年未與勞動者訂立書面勞動合同的，應(yīng)當(dāng)向勞動者每月支付兩倍的工資。（2）若用人單位與勞動者之間的事實勞動關(guān)系超過一年的，默認(rèn)為雙方之間成立了無固定期限勞動合同。依據(jù)《勞動合同法》及相關(guān)實施條例規(guī)定，用人單位自用工之日滿一年未與勞動者訂立書面勞動合同的，自用工之日起滿一年的當(dāng)日視為已經(jīng)與勞動者訂立了無固定期限勞動合同，并應(yīng)當(dāng)立即與勞動者補訂書面勞動合同。用人單位不簽書面勞動合同往往是希望逃避法律義務(wù)，有更靈活的用人權(quán)，而從法律的規(guī)定可見，不與勞動者簽訂勞動合同，用人單位不僅獲得不了靈活的用人權(quán)，還會得不償失，一旦成立無固定期限，用人權(quán)將會受到極大限制，勞動者獲得的將是類似于“鐵飯碗”的穩(wěn)定工作，只有符合法定解除勞動合同情形，用人單位才能解聘勞動者。（3）對于勞動合同到期后沒有續(xù)簽而勞動用工關(guān)系仍然存續(xù)的，勞動者除了可能獲得雙倍工資、無固定期限勞動合同外，還可能獲得解除勞動合同的經(jīng)濟補償金。（4）缺乏書面勞動合同，用人單位將面臨無法有效約束勞動者“誠信義務(wù)”的法律風(fēng)險。根據(jù)勞動法律的規(guī)定，勞動者有“誠實履約”、“忠于本職”、“保守商業(yè)秘密”和“競業(yè)禁止”等誠信義務(wù)。在事實勞動關(guān)系中，因雙方之間沒有簽訂書面勞動合同，往往無法將這些義務(wù)的內(nèi)容和違約責(zé)任具體化、明確化，達(dá)到有效約束員工行為，保障用人單位利益的目的。

綜上，在《勞動合同法》頒布實施后，其系列法律法規(guī)加重了用人單位在事實勞動關(guān)系中的法律責(zé)任和違法成本。因此，用人單位明智之舉應(yīng)該是依法行事，及時與勞動者建立勞動關(guān)系，有效規(guī)避事實勞動關(guān)系帶來的法律風(fēng)險。

三、防范因事實勞動關(guān)系引發(fā)勞資糾紛的建議

（1）作為國家管理層面，一方面要從立法上不斷完善對事實勞動關(guān)系的 保護；另一方面，勞動行政主管部門和司法部門，對事實勞動關(guān)系案件，用人單位有過錯的，及時查處，及時審理，及時處罰。（2）作為用人單位，上至單位領(lǐng)導(dǎo)者，下至人力資源管理人員，思想觀念要正確，要知法守法、依法行事，不可存逃避法律義務(wù)的僥幸心理。（3）用人單位要建立健全勞動關(guān)系管理制度。具體體現(xiàn)在：其一，用人單位與勞動者建立勞動關(guān)系應(yīng)當(dāng)及時訂立書面勞動合同，勞動者拒不簽訂勞動合同的，應(yīng)當(dāng)及時采取相關(guān)措施或通知勞動者解除雙方勞動關(guān)系，針對特殊崗位的員工，用人單位應(yīng)建立特殊的管理制度，并及時有效的執(zhí)行，才能降低企業(yè)勞動人事法律風(fēng)險的發(fā)生。其二，要強化招聘流程的科學(xué)性。很多單位在員工招聘中出于考察擬聘勞動者能力、用工節(jié)約成本等目的，往往采取“先上崗試用，后簽約轉(zhuǎn)正”的方式，從而增加了產(chǎn)生事實勞動關(guān)系的風(fēng)險。解決途徑就是要改變傳統(tǒng)招聘流程，做到“先簽約，后上崗”，以避免超過法定簽約期，支付“雙倍工資”的風(fēng)險。如果勞動者處于個人目的，故意拖延不簽訂勞動合同的，應(yīng)該及時書面通知勞動者終止勞動關(guān)系。其三，健全工作制度，做到合同檔案管理規(guī)范化。員工勞動合同實行科學(xué)規(guī)范、動態(tài)管理，專人負(fù)責(zé)，及時審查，未簽的及時補簽，勞動合同即將期滿該續(xù)簽的續(xù)簽，該終止的提前書面通知。其四，相關(guān)責(zé)任人要實行問責(zé)制。一旦因為部門或具體負(fù)責(zé)人員故意或失誤造成不簽、漏簽勞動合同，給單位造成相應(yīng)損失的，應(yīng)追究相關(guān)人員的責(zé)任。（4）作為勞動者，要有強烈的權(quán)利意識。當(dāng)合法權(quán)益受到侵害時，勞動者要勇于用法律武器維護自身權(quán)益；但是，勞動者也不可目光短淺，滿足于眼前利益，惡意用法，故意不簽勞動合同。另外，事實勞動關(guān)系往往舉證困難，作為弱勢群體，勞動者要注意相關(guān)證據(jù)的留存。

總而言之，用人單位勞動用工法律風(fēng)險是其在招聘及用人過程中存在的重要風(fēng)險之一，在目前《勞動合同法》、《工資支付條例》的立法總體重于保護勞動者利益的環(huán)境下，用人單位應(yīng)當(dāng)重視和理解包括《勞動合同法》在內(nèi)的法律法規(guī)，不斷提高防控勞動用工法律風(fēng)險的能力，促進勞資雙方共同和諧發(fā)展，實現(xiàn)互利共贏。

參考文獻(xiàn)：

篇2

    1 發(fā)病癥狀

    茄子苗期、成株期都可發(fā)病。葉、莖、花、果實均可受害,但主要危害果實。幼苗染病,莖基部或中部初現(xiàn)暗褐色水漬狀病斑,病情發(fā)展快,常腐爛,繼而幼莖變軟縊縮,致幼苗猝倒樣死亡。葉片發(fā)病,初期產(chǎn)生褐綠色不規(guī)則形或近圓形水漬狀較大的病斑,后漸變?yōu)榘岛稚?并在病部上可見較明顯的輪紋。濕度高時病斑上可見稀疏白霉長出,但病健界處不明顯,只有在氣候干燥時病斑邊緣才明顯,無白霉長出,并易干枯破裂。莖稈受害,初呈褐綠色或紫褐色水漬狀病斑,后莖稈漸漸縊縮軟化而折倒,致使病部以上枝葉垂萎至死亡,潮濕時病部可見著生的稀疏白霉。花器受害,多表現(xiàn)褐色腐爛,并向莖部蔓延危害。近地面的茄果易先發(fā)病,在茄果表皮初顯褐黃色至褐黑色近圓形水漬狀斑點,病部略凹陷、軟腐并帶有皺褶,病緣不明顯。隨后病斑蔓延迅速,造成整個茄果被侵染危害,茄果肉呈淡褐色腐爛狀,氣候潮濕時茄果病處著生大量白色棉絮狀濃密霉層,并能使全茄果都長滿,但干燥時只見少而稀疏霉或無霉。病茄果易脫落在地上,在潮濕地面上病情會繼續(xù)發(fā)展,很快造成茄果上長滿白霉、腐爛;在干燥地上病茄果會逐漸腐爛失水,干縮變成褐黑色僵果。

    2 病原形態(tài)

    引起茄子綿疫病的病原菌有多個,均屬于鞭毛菌門真菌。常見的病菌是寄生疫霉(Phytophthora parasitica Dast.)和辣椒疫霉(P. capsici Leon.)。菌絲白色棉絮狀,分枝多,無隔,氣生菌絲發(fā)達(dá)。孢囊梗無色纖細(xì),分枝極少,無隔膜。孢子囊無色或稍黃,球形、卵圓形或長卵圓形,大小為 20~50 μm × 30~70 μm;孢子囊頂端明顯有狀突起,大小為5.8 μm×6.2 μm。菌絲頂端或中間會有大量黃色圓球形厚垣孢子產(chǎn)生,直徑 20~40 μm,壁厚 1.3~2.5 μm,單生或串生。

    3 發(fā)病規(guī)律

    3.1 侵染循環(huán)途徑

    病菌的卵孢子經(jīng)安全越冬后,在來年的茄子生長期,通過雨水濺擊或灌水傳播到近地面的茄株、茄葉或茄果上,從表皮直接侵入或傷口處侵入,進而侵染危害茄子。病斑上產(chǎn)生的游動孢子借助風(fēng)雨或水流進行再傳播侵染危害,周而復(fù)始,擴大侵染流行。秋后在病組織中形成卵孢子隨病殘體組織在土中越冬。

    3.2 發(fā)病氣候條件

    該病的發(fā)生適應(yīng)溫度范圍很廣,在8~40 ℃ 均可。最適宜病菌的發(fā)育、流行的氣候條件是溫度在25~35 ℃、相對濕度85% 以上。實踐中,在茄子整個生長結(jié)果期間,氣溫較易滿足病菌生長流行的需求,因此影響該病發(fā)生早晚、輕重、流行的決定性因素主要是濕度。在適宜的氣候條件下,病菌經(jīng)1~3 d繁殖即可再侵染茄果。在夏季雨季,田間的濕度大,特別是時晴時雨的梅雨天或高溫悶熱天氣,以及暴風(fēng)雨后突然放晴有利于該病的發(fā)生與流行。一般在大雨后的2~3 d,茄子綿疫病往往呈現(xiàn)田間發(fā)病流行高峰。各年度間發(fā)病程度存在較大差異,發(fā)病重且早、損失大的年份往往是雨季出現(xiàn)早、雨日與雨量均多。各地發(fā)病時間也因氣候不同有明顯差別,南方地區(qū)常在5—6月的梅雨季節(jié)及8—9月發(fā)生流行,所以春茄子易遭受嚴(yán)重危害;北方地區(qū)則在7—8月的雨季時易發(fā)生流行。

    3.3 栽培技術(shù)影響

    在設(shè)施栽培生產(chǎn)中,由于大棚塑料薄膜滴水或破損漏雨而引起發(fā)病。另外,土質(zhì)黏重、連茬種植、管理粗放、地勢低洼、地下水位高、雨后積水、排水不良、過度密植、偏施氮肥、雜草叢生的地塊和連續(xù)陰雨的年份發(fā)病較重。植株生長郁閉、嫩綠,田間通風(fēng)透光性不良,也有利于病害發(fā)生。

    4 防控技術(shù)

    4.1 選用適宜的抗病品種

    種植抗病或耐病品種是預(yù)防茄子綿疫病發(fā)生流行的重要措施之一。抗病性在茄子品種間有明顯差異,圓茄種類一般比長茄種類有抗性,厚皮種類一般比薄皮種類有抗性,早熟種類一般比晚熟種類有抗性。抗病或耐病性較好的品種有‘布利塔茄’、‘湘茄4號’、‘寧茄8號’、‘興城紫圓茄’、‘長野狼茄’、‘北京九葉茄’、‘遼茄3號’、‘黑驃茄’等。

    4.2 壯苗定植

    有條件的地方可采用有機基質(zhì)穴盤育苗,培育的秧苗不僅根系發(fā)達(dá),抗病性強,并能避免苗床、育苗營養(yǎng)土帶菌問題,減少病菌侵染機率。定植時堅持選用健壯茄苗,不用病殘茄苗,移栽時盡量帶土少傷根,不給病菌侵染的機會。茄苗健壯標(biāo)準(zhǔn):茄株高度17~20 cm,莖稈粗度0.8~1 cm,節(jié)間長1.3~1.5 cm,真葉有7~8片,葉片深綠色且大而厚,葉間展開度大于株高,生有即將開放的大花蕾,根系呈白色。

    4.3 實行換茬輪作

    與非茄科作物如十字花科、豆科、葫蘆科等實行2年以上輪作,忌重茬。秋冬深翻土層進行冷凍曬垡。選擇地勢較高、排灌方便、沙質(zhì)壤土地塊種植。土地要平整,雨季注意及時排水,做到雨后無積水。

    4.4 提倡地膜覆蓋栽培及合理密植

    覆蓋地膜可有效阻止土中病菌飛濺傳播到茄子上,并利用日光增溫進行高溫滅菌及控雜草生長。依各地自然條件,可選用深溝窄高畦或半高畦栽培方式,溝渠一定要保持通暢,便于田間排水降濕。茄子種植密度要適宜,株行距一般為50 cm × 60 cm,每667 m2種植 2 200~2 500株。種植太密,田間通透性不良,茄株生長軟弱,易感病。

    4.5 加強田間管理

    基肥中農(nóng)家肥必須經(jīng)充分腐熟后再施用,磷鉀肥應(yīng)適當(dāng)增施,追肥要及時。水分管理切忌大水漫灌,在茄子定植時應(yīng)澆足穴水,蹲苗時適當(dāng)控水,緩棵后澆水要濕干相見,有利提高植株抗病力。可采用滴灌等灌溉方式,降低病菌隨灌溉水傳播。為防止茄株側(cè)倒觸及地面,可插竹竿綁定茄株,及時摘除茄株下部老葉,門茄坐果后適時打掉門茄以下側(cè)枝,改善田間通風(fēng)透光條件,有利于降低田間相對濕度,促進植株健壯生長。剛發(fā)病時要隨時去除病葉或病果,清潔田園的殘株落葉,將病殘體攜帶出田外集中深埋或燒毀,以防病菌再次傳播侵染。

篇3

【摘要】 目的 選擇理想的非特異性抗原封閉方法以適應(yīng)基于免疫滲濾法的蛋白芯片制備。方法 以桿狀病毒-昆蟲表達(dá)系統(tǒng)制備的人瘤病毒16型(HPV16)L1蛋白抗原為例，采用脫脂奶粉、小牛血清、牛血清白蛋白及不同組合等5種方法對非特異性抗原進行封閉，檢測其在免疫滲濾實驗中對消除非特異性染色的效果，尋找最佳封閉非特異性染色的方法。結(jié)果 經(jīng)過多次重復(fù)試驗，并以PBS代替血清作空白試驗，結(jié)果顯示，目前常用的先固相然后封閉的幾種方法，其封閉效果的穩(wěn)定性和重復(fù)性不佳，且空白對照易出現(xiàn)假陽性；同時發(fā)現(xiàn)使用脫脂奶粉做封閉劑封閉后，由于奶粉顆粒易堵塞NC膜的孔徑，影響NC膜的滲濾速度；使用小牛血清做封閉劑封閉后，由于NC膜對小牛血清的吸附而產(chǎn)生背景，影響結(jié)果判讀；而采用20g/L BSA先封閉后固相的方法，在實驗中得到滿意的結(jié)果。結(jié)論 先封閉后固相的方法，在免疫滲濾實驗中對非特異性抗原封閉的效果理想、結(jié)果穩(wěn)定、重復(fù)性好，為一種理想的新的封閉方法。

【關(guān)鍵詞】 免疫滲濾法；非特異性染色封閉方法；人瘤病毒16型(HPV16)

ChinaABSTRACT: Objective To select an optimal non-specific antigen blocking method by using immuno-infiltration assay so as to suit protein chip preparation. Methods Human papillomavirus type 16 L1 protein expressed by insect-baculovirus espressin system was incubated with skimmed milk powder， calf serum， bovine serum albumin (BSA) combinations of five kinds of methods to block the non-specific antigen. PBS was used as control. The effect of eliminating non-specific stain was detected by immuno-infiltration assay. Results After repeated tests， the results showed that the stability and repeatability of blocking effects were poor for the fixing up antigen first and then blocking method， and the blank control was prone to false positive. The infiltration rate of NC membrane would be affected by using skimmed milk powder as a blocking agent because the pore of NC membrane was easily plugged by milk powder particles. The use of calf serum as a blocking agent made it very difficult to determine the result because the calf serum absorbed by NC membrane produced the background; however， when 20g/L BSA was used to blocking before fixing up antibody， the results became satisfactory. Conclusion Fixing up antibody after blocking in immuno-infiltration assay showed that the blocking effect against non-specific antigen was satisfactory， stable and repeatable， indicating this method is a novel optimal blocking method compared with others.

KEY WORDS: immuno-infiltration; non-specific staining blocking method; human papillomavirus type 16

免疫滲濾法是以硝酸纖維素膜或醋酸纖維素膜為載體進行快速免疫分析的方法[1]，它實際上屬于快速斑點免疫結(jié)合分析方法(dot immuneobinding assay， DIBA)中的一種，即免疫斑點滲濾分析(dot immunofiltration assay， DIFA)。該法通常是將抗原/或抗體固定于載體上，抗體/或抗原與膜表面固定的配基進行反應(yīng)。該法靈敏度高(可達(dá)ng水平)，操作簡便、快速，不需特殊設(shè)備，目前在低密度蛋白芯片技術(shù)中應(yīng)用最多，但其非特異性著色卻是困惑應(yīng)用者的最大問題[2]。本研究以人瘤病毒16型(HPV16)L1VLP為抗原，對消除免疫滲濾法檢測相應(yīng)抗體時的非特異性染色方法進行了探討，獲得了滿意的結(jié)果。

1 材料與方法

1.1 材料

HPV16L1病毒樣顆粒(VLP)、膠體金標(biāo)記的羊抗人IgG抗體由西安聯(lián)爾科技有限公司制備；硝酸纖維素膜(NC膜，孔徑0.45μm)購自美國Hybond公司；待測血清標(biāo)本來源于西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院(宮頸癌確診患者40例，兒童血清10例)；即溶脫脂奶粉為黑龍江紐迪希亞營養(yǎng)制品有限公司產(chǎn)品；牛血清白蛋白(BSA)購自華美生物工程公司；商品化HPV抗體檢測試劑盒購自加拿大Fulda Biomedical Inc；Tween 20購自美國Promaga公司；小牛血清購自杭州四季青生物材料工程公司。改良TBE洗滌液：Tris Base 54g、硼酸27.5g溶于500mL雙蒸水中，加0.5mol/L EDTA-Na2 20mL，調(diào)至pH8.0，補雙蒸水定容1000mL，加200mL 300g/L飽和硫酸銨[(NH4)2SO4]及40mL Tween 20和雙蒸水480mL，充分混勻后使用。

1.2 蛋白定量

雙縮脲法測定HPV抗原濃度，用生理鹽水調(diào)整蛋白濃度為1g/L。將抗原分成兩份，一份備用，一份直接應(yīng)用微矩陣點樣機。將HPV16抗原點樣于NC膜上，以人IgG(2g/L)為陽性質(zhì)控點，點間距為3mm，點樣量為100mL，并作定位標(biāo)記，自然風(fēng)干待檢 。

1.3 非特異性染色的封閉[3-5]

方法一：取抗原膜100份，浸入10g/L BSA＋0.5g/L Tween 20中，室溫振搖封閉2h，取出50份室溫風(fēng)干；另外50份繼續(xù)封閉4h后室溫風(fēng)干，待檢。方法二：取抗原膜100份，浸入50g/L脫脂奶粉中，室溫振搖封閉2h；取出50份，PBS漂洗2min，室溫風(fēng)干；4h后取另外50份，PBS漂洗2min，室溫風(fēng)干，待檢。方法三：取抗原膜100份，浸入50g/L BSA＋10g/L脫脂奶粉中，室溫振搖封閉2h；取出50份，PBS漂洗2min，室溫風(fēng)干；4h后取另外50份，PBS漂洗2min，室溫風(fēng)干，待檢。方法四：取抗原膜100份，浸入100mL小牛血清中，37℃封閉2h；取出50份室溫風(fēng)干，另外50份直接進行免疫滲濾檢測。方法五：取 HPV16L1VLP(1mg/mL)50μL與等體積20g/L BSA混合，4℃過夜，按上述點樣方法點樣，待檢。

1.4 免疫滲濾實驗

參照文獻(xiàn)[6-7]將干燥的抗原膜片(點樣面朝上)裝入塑料滲濾夾具中，在待檢膜下襯墊吸水材料，壓緊滲濾夾，依次加洗滌液2滴，血清標(biāo)本50μL，洗滌液2滴，適度稀釋的膠體金標(biāo)記羊抗人IgG抗體2滴。每步間隔時間為所加試劑完全滲入后再進行下一步。最后加洗滌液2滴，洗去未結(jié)合的膠體金。以PBS代替血清作空白對照。結(jié)果觀察：在膜中央出現(xiàn)紅色斑點者為陽性，顏色稍淺者為弱陽性，否則為陰性。其下方的質(zhì)控對照點為實驗有效的標(biāo)志，無論陽性或陰性結(jié)果，對照線均應(yīng)顯示紅色。

2 結(jié) 果

以脫脂奶粉、BSA、Tween 20及小牛血清為封閉劑，以不同方法進行封閉，檢測50例相同的血清標(biāo)本，每種封閉方法重復(fù)試驗5次，并以PBS代替血清作空白試驗。結(jié)果顯示，前4種先固相后封閉的方法，其結(jié)果的穩(wěn)定性和重復(fù)性受到封閉溫度、時間及封閉劑濃度等因素變化的影響，且空白對照易出現(xiàn)假陽性；第2種和第3種加入脫脂奶粉的封閉方法，封閉后由于奶粉顆粒易堵塞NC膜的微孔，影響滲濾速度；小牛血清做封閉劑則由于NC膜對小牛血清的非特異吸附而產(chǎn)生背景，影響結(jié)果判讀。而采用20g/L BSA先與抗原共育后再點膜的方法，其封閉效果理想、結(jié)果穩(wěn)定、重復(fù)性好，為一種理想的新的封閉策略。

2.1 封閉效果檢驗

分別用免疫滲濾試驗(先封閉后固相的封閉方法)和商品化HPV抗體檢測試劑盒(按試劑盒說明書進行)檢測40例宮頸癌患者血清和10例兒童血清，結(jié)果顯示，免疫滲濾試驗的靈敏度[82.5%(33/40)]和特異度[90%(9/10)]與商品化HPV抗體檢測試劑盒的靈敏度[85%(34/40)]和特異度[80%(8/10)]，經(jīng)Fisher確切概率法檢驗差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05，表1)。表1 免疫滲濾法與商品化試劑盒檢測HPV抗血清的結(jié)果比較（略）兩種不同方法檢測結(jié)果比較，P>0.05(Fisher確切概率法)。

2.2 特異性阻斷吸附試驗

隨機抽取5份陽性患者血清，各取50μL分別加入等量的包被抗原，混勻，4℃過夜，10000r/min離心30s，同時用商品化抗HPV16L1抗體與抗原VLP共育后點膜，再行免疫檢測，結(jié)果均為陰性。而用 20g/L BSA行相同處理后，檢測結(jié)果為陽性。

2.3 敏感性試驗

隨機抽取5份陽性血清，用生理鹽水按1∶1、1∶2、1∶3、1∶4、1∶5稀釋，混勻后各取50μL進行免疫滲濾法檢測，結(jié)果顯示在1∶4稀釋的血清標(biāo)本仍出現(xiàn)弱陽性。

2.4 穩(wěn)定性和重復(fù)性試驗

將第5種封閉方法制備的抗原膜片置37℃溫箱2d和室溫保存30d，與放置4℃的抗原膜片對照檢測陽性血清和陰性血清，分批先后作5次試驗，均獲得相同結(jié)果。

3 討 論

免疫反應(yīng)是以其高度特異性為特征，利用免疫反應(yīng)的特異性和敏感性已建立了許多臨床檢測方法。隨著臨床檢測所需樣品的微量化，檢測過程/結(jié)果判讀的快速化，如何保證結(jié)果的特異性就成為最受關(guān)注的問題。以往在免疫細(xì)胞/組織化學(xué)/蛋白印跡染色過程中對消除非特異性染色已有較多的報道，且積累了豐富的經(jīng)驗。在這些實驗中，可以同時兼顧“速度”和“特異性”，為了最大程度獲得特異性，可以多重/長時間處理以消除非特異性著色。但對于臨床檢測，特別是近年來以硝酸纖維素膜為載體的快速免疫分析，除準(zhǔn)確性外，速度成為設(shè)計中最關(guān)鍵的參數(shù)。如何在基于硝酸纖維素膜為載體的快速斑點免疫滲濾分析的蛋白芯片制備過程中同時兼顧快速和特異性，是這一技術(shù)的關(guān)鍵[8]。目前最常用的非特異性染色消除方法是先在載體膜上進行點樣，然后應(yīng)用BSA或脫脂奶粉結(jié)合Tween 20、Tween 80、Triton X-100等進行封閉。工作中發(fā)現(xiàn)，這些方法雖然有一定的效果，但在封閉后的穩(wěn)定性、重復(fù)性及抗原保存上仍不夠理想[9]。本實驗選擇5種不同的封閉方法，結(jié)果發(fā)現(xiàn)以先點膜固相后再封閉，均不能得到理想的效果，而將1g/L的抗原與等體積的20g/L BSA預(yù)先混合，4℃共育過夜，然后固相于NC膜上，其封閉效果極佳，避免了BSA的浪費，點樣后的抗原膜室溫保存30d以上仍很穩(wěn)定，且操作方便、靈敏度高、結(jié)果可靠。分析與對照實驗出現(xiàn)誤差的原因，可能是由于抗原的濃度不同而靈敏度也不同，以及與所選用硝酸纖維素膜的性能和質(zhì)量、膜孔徑大小和均一性不同有關(guān)。這些問題有待于進一步研究。

參考文獻(xiàn)

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篇4

關(guān)鍵詞 當(dāng)代 大學(xué)生 法律意識 缺失

中圖分類號：G641 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

當(dāng)代大學(xué)生的法律意識卻比較薄弱，大學(xué)生犯罪呈現(xiàn)逐年增加趨勢。要想提高大學(xué)生的法律意識，就應(yīng)重視當(dāng)代大學(xué)生的法律意識缺失的現(xiàn)狀，優(yōu)化當(dāng)代大學(xué)生發(fā)法律意識缺失的現(xiàn)狀。在探索當(dāng)代大學(xué)生的法律意識缺失的過程中，如何培養(yǎng)當(dāng)代大學(xué)生的法律意識是當(dāng)前大學(xué)生教育關(guān)注的重要課題。因此，研究當(dāng)代大學(xué)生的法律意識缺失具有十分重要的現(xiàn)實意義，有利于提高當(dāng)代大學(xué)生遵紀(jì)守法的意識。鑒于此，筆者對當(dāng)代大學(xué)生法律意識的缺失進行了初步探討。

一、當(dāng)代大學(xué)生法律意識缺失的體現(xiàn)

影響當(dāng)代大學(xué)生法律意識培養(yǎng)的因素較多，阻滯了法律制度的實施效果。就目前而言，當(dāng)代大學(xué)生的法律意識缺失，主要表現(xiàn)在三個方面，即法律認(rèn)知偏差、法律情感淡薄和法律意識缺失，其具體內(nèi)容如下：

（一）法律認(rèn)知偏差。

法律認(rèn)知就是大家對法律制度內(nèi)容的了解和把握程度。當(dāng)代大學(xué)生的法律意識缺失與當(dāng)代大學(xué)生的法律認(rèn)知偏差不無關(guān)系。法律認(rèn)知是法律意識理性認(rèn)識的產(chǎn)物，是法律意識的知識基礎(chǔ)。法律認(rèn)知偏差的出現(xiàn)，是根據(jù)一定表現(xiàn)的現(xiàn)象或虛假的信息而對他人作出判斷，大學(xué)生的法律認(rèn)知是建立在大學(xué)生對法律知識的了解和掌握的基礎(chǔ)之上的。但是，由于當(dāng)代大學(xué)生對法律基礎(chǔ)知識的認(rèn)識不足，造成法律認(rèn)知偏差，致使在理解法律相關(guān)知識時存在著缺陷。

（二）法律情感淡薄。

法律情感淡薄也是當(dāng)代大學(xué)生的法律意識缺失的重要表現(xiàn)。在當(dāng)代大學(xué)生的法律意識中，法律情感是社會主體基于對法律認(rèn)識的基礎(chǔ)上產(chǎn)生的對法律的感情。情感體驗就是用感性帶動心理的體驗活動，法律情感與法律意識密切聯(lián)系，是法律意識的感情因素和心理動力。當(dāng)代大學(xué)生的法律情感較為淡薄，對法律缺乏親近感，不適應(yīng)我國法制現(xiàn)代化和法律意識現(xiàn)代化建設(shè)。

（三）法律信仰缺失。

法律信仰缺失在當(dāng)代大學(xué)生中也普遍存在。法律信仰是法治建設(shè)不可或缺的內(nèi)在要求，大學(xué)生的法律信仰，即大學(xué)生在現(xiàn)代社會環(huán)境下對法及法律現(xiàn)象反應(yīng)過程中所形成的法律理想信念，在大學(xué)生法律意識結(jié)構(gòu)中居于最高理性層次。法律信仰是法制建設(shè)的奮斗目標(biāo)，目前，大學(xué)生不同程度的存在著法律信仰缺失的現(xiàn)象，制約著我國法制建設(shè)的進程。因此，培養(yǎng)當(dāng)代大學(xué)生的法律意識勢在必行。

二、培養(yǎng)當(dāng)代大學(xué)生法律意識的策略

在了解當(dāng)代大學(xué)生法律意識缺失的現(xiàn)狀的基礎(chǔ)上，為促進當(dāng)代大學(xué)生法律意識的提高，培養(yǎng)當(dāng)代大學(xué)生法律意識的策略，可以從以下三個方面入手：

（一）培養(yǎng)當(dāng)代大學(xué)生的法治主體意識。

培養(yǎng)當(dāng)代大學(xué)生的法治主體意識是培養(yǎng)當(dāng)代大學(xué)生法律意識的關(guān)鍵。法治主體意識，是指在依法治國的環(huán)境下發(fā)揮主體的自覺能動性，積極的參與法治建設(shè)的意識。要想提高大學(xué)生學(xué)法的自覺性，培養(yǎng)當(dāng)代大學(xué)生的法治主體意識，首先需培養(yǎng)其自覺參與立法、帶頭守法的意識。其次，要使大學(xué)生做到要嚴(yán)格執(zhí)法，勇于護法，使其真正形成依法辦事的良好習(xí)慣。最后能夠清晰地認(rèn)識自身的責(zé)任不是法律強加的，而是行使權(quán)利時的必然選擇。

（二）培養(yǎng)當(dāng)代大學(xué)生的法律至上意識。

培養(yǎng)當(dāng)代大學(xué)生的法律至上意識是培養(yǎng)當(dāng)代大學(xué)生法律意識的重要環(huán)節(jié)。所謂法律至上，就是指在一定范圍內(nèi)，居于最高地位、享有最高權(quán)威、具有最高效力的是法律。只有樹立法律至上的意識，把法律作為最終的、最權(quán)威的價值判斷標(biāo)準(zhǔn)，才有可能建設(shè)民主法治的社會。培養(yǎng)當(dāng)代大學(xué)生的法律至上意識，需要大學(xué)生正確處理法與權(quán)、法與情的關(guān)系。拋棄一切對于法的錯誤觀念，從而真正樹立起法律至上的意識。

（三）培養(yǎng)當(dāng)代大學(xué)生的法律運用意識。

培養(yǎng)當(dāng)代大學(xué)生的法律運用意識也是培養(yǎng)當(dāng)代大學(xué)生法律意識的有效途徑。培養(yǎng)當(dāng)代大學(xué)生的法律運用意識，必須明確權(quán)利與義務(wù)相統(tǒng)一的意識。要明確權(quán)利與義務(wù)相統(tǒng)一的意識，培養(yǎng)當(dāng)代大學(xué)生的法律運用意識，可以從兩個方面采取措施，一方面，要樹立依法行使權(quán)利的意識，真正做到行使自己的合法權(quán)利。另一方面，要樹立自覺履行義務(wù)的意識。法律義務(wù)是社會主體根據(jù)法律的規(guī)定必須承擔(dān)的作為或不作為責(zé)任，意味著法律對法律關(guān)系主體的一種約束。對此，需要引導(dǎo)大學(xué)生深刻認(rèn)識到權(quán)利與義務(wù)是相統(tǒng)一的，從根本上提高大學(xué)生的法律意識。

三、結(jié)語

總之，當(dāng)代大學(xué)生法律意識的培養(yǎng)是一項綜合的系統(tǒng)工程，具有長期性和復(fù)雜性。面對當(dāng)代大學(xué)生法律意識缺失的現(xiàn)狀，要培養(yǎng)當(dāng)代大學(xué)生法律意識，應(yīng)培養(yǎng)當(dāng)代大學(xué)生的法制主體意識、培養(yǎng)當(dāng)代大學(xué)生的法律至上意識、培養(yǎng)當(dāng)代大學(xué)生的法律運用意識，不斷探索培養(yǎng)當(dāng)代大學(xué)生法律意識的策略，只有這樣，才能不斷提高當(dāng)代大學(xué)生的法律意識，提高當(dāng)代大學(xué)生的法律能力，改善當(dāng)代大學(xué)生法律意識缺失的現(xiàn)狀。

（作者：閩南師范大學(xué)本科在讀，研究方向：法學(xué)）

參考文獻(xiàn)：

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篇5

論文關(guān)鍵詞：大學(xué)生法律意識；現(xiàn)狀；途徑 

“依法治國”的治國方略和建設(shè)社會主義法治國家的法治目標(biāo)的確立，使中國步入了法制現(xiàn)代化的快車道。任何一項偉大事業(yè)的背后，必然存在著一種無形的精神力量。我國“社會主義法治國家”宏偉目標(biāo)的確立，不僅僅是一個簡單選擇和積極著手實施的問題，而首先是個理性思考、樹立法律意識和法治新思維的問題。大學(xué)生是未來社會主義建設(shè)事業(yè)的中堅力量，其法律意識的狀況將直接關(guān)系到社會主義法治建設(shè)的成效。 

一、大學(xué)生法律意識的內(nèi)涵 

大學(xué)生法律意識是我國社會法律意識的重要組成部分，它既具備社會主義現(xiàn)代法律意識的基本內(nèi)容和特征，又有自己的特征，同時還區(qū)別于一般社會群體的法律意識。具體來說，與其他社會群體的法律意識相比較，大學(xué)生的法律意識有以下幾個特點：第一，層次性。大學(xué)生法律意識的層次性，指的是由于大學(xué)生所處的年級、專業(yè)的不同，從而具有不同水平的法律意識，表現(xiàn)出一定的層次性。第二，矛盾性。大學(xué)生的法律意識在總體上具有一定的矛盾性。大學(xué)生一方面對我國的法制建設(shè)非常關(guān)心，表現(xiàn)出要求加快和完善法制建設(shè)的迫切心情和強烈愿望，也認(rèn)識到法制建設(shè)是一個長期發(fā)展的過程；另一方面，有時有部分同學(xué)對我國的法制狀況仍持冷漠、偏激的態(tài)度，甚至對我國的法治表示懷疑和不信任。第三，不平衡性。大學(xué)生法律意識的不平衡性主要表現(xiàn)在以下方面：大學(xué)生的憲法意識弱于部門法律意識；在具體的部門法里，大學(xué)生的民法意識、經(jīng)濟法意識、刑法意識、婚姻法意識、繼承法意識等普遍高于行政法意識；大學(xué)生的實體法意識普遍高于訴訟法意識。第四，不成熟性。由于大學(xué)生尚未形成科學(xué)的人生觀、世界觀，觀察問題、分析問題還不夠全面，使得他們的法律意識的內(nèi)容帶有明顯的易變性和不成熟性。 

二、大學(xué)生法律意識的現(xiàn)狀 

（一）法律認(rèn)知偏差 

法律認(rèn)知是人們對法律現(xiàn)象，主要是對現(xiàn)行法律制度內(nèi)容的了解和把握程度。法律認(rèn)知是法律情感和法律信仰的前提，影響和決定著法律情感和法律信仰的形成。大學(xué)生的法律認(rèn)知是建立在大學(xué)生對法律知識的了解和掌握的基礎(chǔ)之上的。由于大學(xué)生法律知識的缺乏，經(jīng)常表現(xiàn)出對一些我們常說的法律詞語的不理解或是理解不準(zhǔn)確。 

（二）法律情感淡薄 

在法制現(xiàn)代化和法律意識現(xiàn)代化的過程中，作為法律意識還相對淡薄的大學(xué)生來說，這些方面的情感就比較缺乏。具體表現(xiàn)在以下幾個方面：首先，法律正義感不強。大學(xué)生對法的民主基礎(chǔ)尚未有明確的意識，仍然秉持一種作為統(tǒng)治工具的傳統(tǒng)意義上的或者說專制統(tǒng)治下的法律觀，對法律正義性的信賴不足；大部分大學(xué)生不了解現(xiàn)行法律現(xiàn)象和法律制度，對其公平和正義性也不甚理解，也就很難有法律的情感產(chǎn)生。其次，法律信任感較差。當(dāng)前我國法制建設(shè)不能夠跟上市場經(jīng)濟建立的步伐，致使存在一定的、甚至是嚴(yán)重的腐敗行為，使得大學(xué)生片面的觀察這樣的狀況，這在一定程度上影響了大學(xué)生對法律的信任感。表現(xiàn)在日常生活中，部分大學(xué)生覺得法律在一定程度上不能夠懲惡揚善，因而對法律的信任感也就比較差。 

（三）法律信仰缺失 

大學(xué)生的法律信仰卻令人擔(dān)憂，部分大學(xué)生并未形成一定意義上的法律信仰。具體來看，大學(xué)生法律信仰的缺乏主要表現(xiàn)在：首先，法律規(guī)范的信仰失落。當(dāng)前大學(xué)生對法律規(guī)范的信仰日漸失落，主要表現(xiàn)在有一部分大學(xué)生對法律不信任、不尊重和不服從，更有甚者對合法效力的法律予以蔑視、踐踏，公

然以身試法，最終造成害人害己、令人扼腕的后果。其次，社會秩序的信仰缺失。大學(xué)生缺乏一定的對社會秩序的信仰，或者簡單的過分夸大或者否認(rèn)良好法律秩序的存在，進而也就很難將之轉(zhuǎn)化為自覺服從和自覺遵守法律，并且在必要的時候甘愿為了法律而不惜犧牲自己的生命。 

三、大學(xué)生法律意識培養(yǎng)的途徑 

（一）樹立以培養(yǎng)大學(xué)生法律意識為目標(biāo)的教育理念 

傳統(tǒng)的教育模式?jīng)]有把培養(yǎng)學(xué)生具有較強的法律意識作為其目標(biāo)的理念，這直接影響到教學(xué)的方方面面。因此，培養(yǎng)大學(xué)生法律意識必須首先轉(zhuǎn)變教育理念，樹立全新的以培養(yǎng)學(xué)生的法律意識為目標(biāo)的教育理念。教育機構(gòu)要樹立注重法律意識培養(yǎng)的新教學(xué)理念，即轉(zhuǎn)變教學(xué)觀念，摒棄過去那種只注重理論方面的教學(xué)、只傳輸給學(xué)生法律知識的舊理念，而重新樹立一種注重知識的輸送更注重法律意識的培養(yǎng)的新教學(xué)理念。

（二）合理設(shè)置大學(xué)生法律課程 

合理設(shè)置大學(xué)生法律課程，是指基于對國家的教育方針、高等院校培養(yǎng)人才的模式以及大學(xué)生法律意識培養(yǎng)的重要性方面因素的綜合考慮而合理安排相關(guān)的大學(xué)生法律課程。通過問卷調(diào)查和收集學(xué)生的反饋信息了解到，現(xiàn)在一些大學(xué)的法制教育供需矛盾很尖銳。一方面，學(xué)生希望學(xué)校開設(shè)系列法學(xué)選修課或法學(xué)輔修課，給他們提供更多的接受法制教育機會，滿足他們學(xué)法的需求。另一方面，原來學(xué)校還有一門法律基礎(chǔ)課，能夠?qū)W(xué)生進行相對系統(tǒng)的法制教育，而隨著高校思想政治理論課的改革，《大學(xué)生思想道德修養(yǎng)》和《法律基礎(chǔ)》兩門課程合為《思想道德修養(yǎng)與法律基礎(chǔ)》一門課。遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足學(xué)生求知的欲望。 

（三）大膽探索大學(xué)生法律意識培養(yǎng)方式 

法學(xué)作為一門社會科學(xué)，它與我們每個人的社會生活緊密相關(guān)，是一門實踐性很強的學(xué)科。大學(xué)生法律意識培養(yǎng)一定要充分調(diào)動每個學(xué)生的積極性、主動性，讓他們參與到教學(xué)過程中是很有必要也是切實可行的。教學(xué)中，要運用多種教學(xué)形式，大膽探索大學(xué)生法律意識培養(yǎng)方式。首先，案例教學(xué)要貫穿始終。案例分析一定要透徹，不能只講出法院的判決結(jié)果和法律條文就行了，重要的是要引導(dǎo)學(xué)生思考法律規(guī)定的合理性與科學(xué)性，以及法律思想和法律精神所在。其次，討論式教學(xué)應(yīng)該經(jīng)常運用。尤其是要留一些問題給學(xué)生課后討論，這樣會促進學(xué)生積極去思考問題和探討問題，經(jīng)他們激烈討論過的問題會給他們留下深刻印象。再次，開放式教學(xué)也不可缺少。開放式教學(xué)就是教師事先不給學(xué)生留特定問題，讓學(xué)生自己去尋找與法學(xué)有關(guān)的問題，而后到講臺上去講。這樣做一方面調(diào)動了學(xué)生的積極性和創(chuàng)造性，另一方面鍛煉了學(xué)生的口才，提高了學(xué)生的表達(dá)能力。此外，利用多媒體等電化教學(xué)手段、請法學(xué)專家、學(xué)者、知名律師搞講座等也很重要。 

（四）充分利用各種渠道和途徑 

要充分利用各種渠道和途徑，強化當(dāng)代大學(xué)生法律意識。首先，健全法律運行機制，為培養(yǎng)和強化當(dāng)代大學(xué)生法律意識提供法制保障。健全法律運行機制，要求立法民主化和科學(xué)化，執(zhí)法程序化和公正化，守法自覺化，法律監(jiān)督制度化。其次，加強權(quán)力道德建設(shè)，懲治腐敗，為培養(yǎng)和強化當(dāng)代大學(xué)生法律意識創(chuàng)造良好的外部環(huán)境。再次，社會、家庭、學(xué)校三位一體，有機配合，形成強化當(dāng)代大學(xué)生法律意識的社會合力。要積極營造有利于強化大學(xué)生法律意識的社會氛圍；家庭要加強基本道德規(guī)范的教育，為強化大學(xué)生法律意識提供適宜的土壤；學(xué)校要發(fā)揮法律意識養(yǎng)成教育的主渠道作用，采取措施提高教育效果。 

（五）建立高素質(zhì)的師資隊伍 

具體來說，法律教師要秉承法治觀念，具備多種能力與素養(yǎng)：首先，應(yīng)當(dāng)熱愛法律教育事業(yè)，對法律教育抱有很強烈的熱情，應(yīng)有忠誠和獻(xiàn)身于國家法律教育事業(yè)的崇高使命感和強烈的工作責(zé)任心。其次，教師應(yīng)適當(dāng)參與法律實踐，更充分地了解司法實踐，提高自身的法律運用能力和知識含量。再次，教師應(yīng)該具有使用專業(yè)的法言法語的語言能力。法律是一種專門的技術(shù)知識，法律語言是這項專門知識中的最基本的要素。法律教師應(yīng)該持之以恒地把法律語言滲透到教學(xué)過程中。